丹参素钠的高效液相色谱测定法

本方法适用于保健食品中丹参素的测定。

本方法丹参素的检测限为0．05ng。

本方法线性范围为25～100μg／ml。

1．方法

提要试样中的丹参素经提取后，在高效反相色谱C1,柱分离，用紫外检测器检测，以外标法测定其含量。

2．仪器高效液相色谱仪，带紫外检测器或二极管阵列检测器。

3．试剂除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB／T6682规定的一级水。

(1)甲醇：色谱纯。

(2)乙腈：色谱纯。

(3)1％乙酸(V／V)溶液：取10ml乙酸加水至1000ml，溶解混匀，过0．45μm微孔滤膜，待用。

(4)流动相：甲醇+1％乙酸(V／V)溶液(10+90，V／V)。

(5)丹参素钠对照品：中国生物制品检定所。

(6)丹参素钠标准溶液：精密称取丹参素钠对照品0．0100g，移入100ml棕色容量瓶中，加入甲醇，以超声波振荡助溶，定容，成浓度为100μg／ml的标准工作液。再逐级稀释成浓度为25μg／ml、50μg／ml、100μg／ml的标准溶液。

(1)样品处理：称取均匀样品1．0g(精确到0．1mg)，置于50ml棕色容量瓶中，加入40ml甲醇，以超声波振荡30min，取出，冷却后用甲醇定容至刻度，摇匀，经0．45μm微孔滤膜过滤，清液待分析。

(2)标准工作曲线绘制：分别取10μl丹参素钠标准工作系列溶液(25μg／ml、50μg／ml、100μg／ml)进样分析，以测得的丹参素钠的峰面积分别对丹参素钠的浓度绘制标准曲线。

(3)色谱条件

色谱柱：ODS液相色谱柱，4．6mm×150mm，5μm。

流动相：甲醇+1％乙酸(V／V)溶液(10+90，V／V)。

流速：1．0ml／min。

柱温：室温。

检测波长：280nm。

(4)样品测定：取样品滤液10μl进液相色谱仪分离测定，根据色谱峰保留时间定性，以外标峰面积法进行定量。

(5)色谱图：丹参素钠标准色谱图见图3—89，

丹参素钠标准色谱图

根据待测样品色谱峰面积，由标准曲线回归方程式得样品液中丹参素钠含量，计算出样品中丹参素钠的含量。样品中丹参素钠含量按下式进行计算：

X=(c×V×100×197)/(m×220×1000×1000)

式中X——样品中丹参素含量(g／100g)；

c——进样液中丹参素钠的浓度(μg／ml)；

V——样品的定容体积(ml)；

m——样品的取样量(g)；

197——丹参素的分子量；

220——丹参素钠的分子量。

免责声明：以上信息没有经过国家食品药品监督管理局评估和确认，来自公开发表的文献，由植提网整理发布，仅供参考。

如果您想对该产品信息进行补充请在文章后留言或者联系我们网站客服，将有机会获得免费企业或个人推广资格