植提网-植物提取物行业百科全书(始于2011年)『声明:本站不参与任何植物提取物产品销售事宜,目前网上出现以植提网进行宣传的网站皆与本站无关,植提网官网请认准www.pewiki.net,以防上当受骗』

原花青素的分光光度测定法

2013-10-05    分类:检测方法    0人评论

本方法适用于各种植物组织、器官及其制剂(如葡萄子与松树皮提取物)中原花青素含量的测定。

1.方法

提要原花青素(也称缩合单宁)是黄烷一3一醇的寡聚体与多聚体,属多酚类化合物。与其他酚类化合物不同,黄烷醇(缩合单宁、单体、双体等)在酸性介质中可与香草醛反应,生成在500nm处有最大吸收的有色物质,可通过比色测其含量。

2.仪器

分光光度计。

3.试剂

所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。
(1)香草醛、甲醇、浓盐酸均为分析纯级。
(2)提纯的原花青素或儿茶素。
(3)4%香草醛甲醇液。
(4)标准使用液:将提纯的原花青素溶于蒸馏水,制成1mg/ml储备液,将储备液稀释至终浓度为1×10^(-2)mg/m1至1mg/ml的标准使用液。标准使用液应于测定当天配制。如无提纯的原花青素,可用儿茶素代替,配制方法同上。

4.测定步骤

(1)样品中原花青素液的制备:植物材料经4倍体积丙酮+水(7+3,体积比)或者经60%甲醇提取,40℃以下减压蒸馏去除有机溶剂,水相再经乙醚洗涤后定容。
冰冻干燥的固体原花青素制剂,直接溶于水中(先加少量甲醇助溶),制成原花青素液。原花青素液于5℃下暗环境中保存备用。
(2)样品测定:用锡箔将试管(14mm×120mm)包裹严,仅留管El用于加样。向管内加入试样0.5ml,再加3.0ml 4%香草醛甲醇液混合,然后加入1.5ml浓盐酸,彻底混匀,室温下显色15min,也可在暗环境下进行以上操作。最后在500nm处比色。
可按以上操作步骤制得标准曲线(0.1mg原花青素在500nm处的吸收值为0.55)。

5.结果计算

计算原花青素量的公式:
原花青素(1×10-3mg)=A500nm÷0.55×100×V
式中V——试样稀释体积(倍数)。

6.注释

(1)本方法的检测范围为(5~500)×10-3mg/0.5ml样液。精密度与准确度大于1×10-3mg。
(2)反应试管应用清洁剂浸泡24小时,彻底洗涤干净。
(3)进行比色时,用水作空白对照。
(4)500nm处的OD值应控制在3以下。
(5)试样中花青素含量较高时,应从香草醛存在下所测A500nm值中减去无香草醛时所测值。
(6)显色液应避光放置。

版权申明:转载请注明 植提网 » 原花青素的分光光度测定法

免责声明:以上信息没有经过国家食品药品监督管理局评估和确认,来自公开发表的文献,由植提网整理发布,仅供参考。

如果您想对该产品信息进行补充请在文章后留言或者联系我们网站客服,将有机会获得免费企业或个人推广资格
植提网有您找的植物提取物信息
继续查看有关 的文章

看过本文的还看过

我来说说

*

*

取消