本方法适用于含橘红、骨碎补、枳壳及其提取物为主要原料的保健食品中柚皮苷(naring-in)的测定。
本方法柚皮苷的检出限为1.9ng。
1.方法
提要样品中的柚皮苷用甲醇超声提取后,在高效液相色谱仪中用反相柱分离,283nm紫外吸收,用外标法定量。
2.仪器
(1)高效液相色谱仪、紫外检测器。
(2)超声波提取器。
3.试剂
(1)甲醇:分析纯、色谱纯。
(2)醋酸:分析纯。
(3)超纯水:双蒸水经Milli—Q型纯水器过滤。
(4)柚皮苷对照品:中国药品生物制品检定所。准确称取柚皮苷对照品5mg,置于25ml容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,制成0.2mg/ml的标准溶液,再用甲醇稀释为0.02mg/ml、0.04mg/ml、0.06mg/ml、0.08mg/ml、0.10mg/ml的标准使用液。
4.测定步骤
(1)样品制备:准确称取混合均匀的样品内容物适量(约1~2g,视含量而定),糖浆状样品可直接称取,液状样品可减压浓缩,置于lOOml容量瓶中,加甲醇60ml超声提取30rain,冷却后,加甲醇至刻度,摇匀,静置,取上清液用0.45μm滤膜过滤,于高效液相色谱仪中进样测定。
(2)标准曲线制备:上述各标准使用液分别注入高效液相色谱仪中,记录峰面积,以相应的对照品浓度值作图。
(3)色谱条件色谱柱:
Kromasil C18,5μm,250mm×4.6mm。
流动相:甲醇+水+醋酸(35+61+4,V/V/V)。
波长:283nm。
进样量:10ml。
流速:1.0ml/min。
5.结果计算
X=(c×V×100)/(m)
x——样品中柚皮苷含量[mg/lOOg(m1)];
c——从标准曲线查得样液中柚皮苷的质量(mg);
V——样液定容体积(ml);
M——样品质量(g或ml);
6.注释
(1)本方法线性范围为0.02~0.10mg/ml;r=0.9998。
(2)本方法平均回收率为99.7%,RSD为4.1%(n=3)。
(3)精密度:RSD为1.1%(n=6)。
(4)附:某橘红膏柚皮苷的标准及样品色谱图(图3—28、3—29)。
版权申明:转载请注明 植提网 » 柚皮苷的高效液相色谱测定法
免责声明:以上信息没有经过国家食品药品监督管理局评估和确认,来自公开发表的文献,由植提网整理发布,仅供参考。
如果您想对该产品信息进行补充请在文章后留言或者联系我们网站客服,将有机会获得免费企业或个人推广资格