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洛伐他汀的薄层分析测定法

2013-10-12    分类:检测方法    0人评论

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本方法适用于保健食品中洛伐他汀(lovastatin)的测定。
本方法洛伐他汀的检出限为4.0μg。

1.方法

提要样品中洛伐他汀用适当浓度乙醇提取后,以硅胶G薄层层析,碘蒸气显色,与洛伐他汀标准的R,比较定性,与标准系列的斑点大小、颜色深浅比较定量。

2.仪器

(1)硅胶G板:10em×20em。
(2)层析缸:20era×15am×30em。
(3)25μl微量注射器。

3.试剂

本方法所用试剂除特殊注明外,均为分析纯;所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。(1)乙醇溶液(75%):25ml水中加入无水乙醇75ml,混匀。
(2)标准溶液:准确称取洛伐他汀标准品10.Omg,置于lOml容量瓶中,加75%乙醇溶解,并稀释至刻度,混匀,置冰箱中保存。此溶液每1ml含洛伐他汀1.Omg。
(3)二氯甲烷(
4)碘。
(5)展开剂:二氯甲烷+丙酮(4+1)。

4.测定步骤

(1)样品处理:准确称取混合均匀的样品1.0g左右,置于25ml容量瓶中,加75%乙醇溶液10ml左右,超声波提取30min,补加75%乙醇至刻度,混匀后过滤,弃去初滤液,收集滤液进行薄层分析。
(2)薄层分析:用微量注射器准确吸取样品溶液4.0μl,点状点于硅胶G板上,同时吸取标准溶液2.0μ1、4.0μl、6.0μl,在点有样品溶液的同一薄层板上分别进行点状点样,每点间隔1.5cm,挥干溶剂后,置于预先用展开剂饱和的盛有展开剂60ml左右的展开缸中,上行展开12cm,取出晾干,置碘蒸气中显色2min左右,在自然光下观察,以样品斑点与标准斑点R,比较定性,样品斑点与标准系列斑点面积大小、颜色深浅比较定量。如不用薄层扫描定量,只用肉眼观察,则是半定量。

5.结果计算

X=(m1×V)/(m×V1)×1000

式中X——样品中洛伐他汀含量(μg/g);
m1——样品测定液相当于洛伐他汀标准斑点的质量(μg);
V——样品提取液总体积(m1);
m——样品质量(g);
V1——点样体积(μ1);
1000——体积换算系数。

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