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红景天苷的高效液相色谱测定法(二)

2013-10-20    分类:检测方法    0人评论

本方法适用于以景天科植物大花红景天、高山红景天或其提取物为主要原料的保健食品中红景天苷(salidroside)的测定。
本方法红景天苷的检出限为2.1ng。

1.方法

提要样品直接用甲醇超声提取后,在高效液相色谱仪中用反相柱分离,275nm紫外吸收,以外标法定量。

2.仪器

(1)高效液相色谱仪、紫外检测器。
(2)超声波提取器。

3.试剂

(1)甲醇:分析纯、色谱纯。
(2)超纯水:双蒸水经Milli—Q型纯水器过滤。
(3)红景天苷对照品:中国药品生物制品检定所。
(4)红景天苷标准使用液:准确称取红景天苷对照品5mg,用甲醇溶解并定容至10ml,为标准红景天苷贮备液,临用前再用甲醇稀释至O.01~0.16mg/ml的标准使用液。

4.测定步骤

(1)样品制备:准确称取样品适量,置于100ml容量瓶中(液体试样可减压浓缩至近干),加甲醇约50ml,超声波提取30min后,冷却,加甲醇至刻度,混匀,静置,取上清液过0.45μm微孔滤膜后,在高效液相色谱仪中进样测定。
(2)标准浊线绘制:标准使用液各点分别在高效液相色谱仪中进样测定,并记录相应的峰面积值,以相应的峰面积值对标准使用液浓度绘制标准曲线。
(3)色谱条件

色谱柱:Kromasil C18,250mm×4.6mm,5μm。
流动相:甲醇+水(18+82)。
波长:275nm。
流速:1ml/min。
进样量:10μl。

5.结果计算

X=(c×V×100)/m

式中x——样品中红景天苷含量[mg/100g(ml)];
c——从标准曲线查得样液中红景天苷的质量(mg)。
V——样液定容体积(ml)。
m——样品质量(g或ml)。

6.注释

(1)本方法线性范围为0.01~0.16mg/ml,r=0.9999
(2)本方法平均回收率为98.8%(凡=3),RSD=1.9%。
(3)精密度RSD=1.3%(17,=5)。
(4)附:某软胶囊红景天苷的标准及样品色谱图(图3—109、3—110)。

红景天苷标准色谱图

红景天苷标准色谱图

红景天苷样品色谱图

红景天苷样品色谱图

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