植提网-植物提取物行业百科全书(始于2011年)『声明:本站不参与任何植物提取物产品销售事宜,目前网上出现以植提网进行宣传的网站皆与本站无关,植提网官网请认准www.pewiki.net,以防上当受骗』

芦丁的高效液相色谱测定法

2013-08-16    分类:检测方法    0人评论

本方法适用于植物类食品中芦丁的测定。
本方法芦丁的检出限为20ng。

1.方法提要

芦丁为黄酮类化合物的一种,结构为槲皮素一3—0一芸香糖,植物类样品用石油醚脱脂后,经甲醇加热回流提取芦丁,以反相高效液相色谱法分离,在紫外检测器350nm条件下,以保留时间定性、峰面积定量。

2.仪器

(1)LC一4A高效液相色谱仪、C—RIB色谱处理机。
(2)检测器(SPD一2AS紫外检测器)。
(3)索氏提取器。
(4)层析柱。
(5)微孔过滤器(滤膜0.45μm)。

3.试剂

(1)甲醇:色谱纯。
(2)芦丁标准品:美国Sigma公司
(3)石油醚:60℃一90℃。
(4)水:重蒸水。
(5)芦丁标准溶液:准确称取在105℃干燥至恒重的芦丁标准品10mg,置于100ml棕色容量瓶中,用无水乙醇溶解后定容至刻度,配成0.1mg/ml的芦丁标准溶液。

4.测定步骤

(1)样品制备

1)固体样品:准确称取2.0000粉末样品于索氏提取器中,用石油醚(60%~90摄氏度)提取脂肪等脂溶性成分,弃去石油醚提取液,剩余物挥去石油醚,再以甲醇加热回流提取1.5小时并定容,用微孔滤膜(0.45μm)滤过后供测定样品含量用。
2)液体样品:准确吸取样品2.0ml,直接以石油醚萃取脱脂,挥去石油醚后,以甲醇溶解并定容,经微孔滤膜(0.45μm)滤过后供测定用。
(2)色谱条件色谱柱:Shim—PactCLC—ODS,6mm×150mm,5μm。
流动相:甲醇+水(55+45),以磷酸调pH至3.5,临用前用超声波除气。
流速:0.8ml/min。
柱温:40℃。
检测波长:UV350nm。
灵敏度:0.016AUFS。
进样量:10μl。
(3)样品测定:准确吸取样品处理液和标准液各10μl,注入高效液相色谱仪进行分离,以其标准溶液峰的保留时间定性,以其峰面积计算出样液中被测物质的含量。标准品色谱图见图3—30,样品色谱图见图3—31。

芦丁色谱图

芦丁色谱图

5.结果计算

x=(S1×c×V)/(S2×m)
式中x——样品中芦丁含量[mg/g(ml)];
S——样品峰面积;
c——标准溶液浓度(mg/ml);
S2:——标准溶液峰面积;
V——样品定容体积(ml);
m——试样质量(g或ml)。

6.注释

(1)本法在芦丁浓度为2~10μg/ml范围内呈直线关系,以最小二乘法计算,其回归方程为Y=593766x+67420,r=0.9992。
(2)精密度:对同一样品在上述条件下重复测定6次,其相对标准差(RSD)为3%。
(3)回收率:样品中加入相似浓度的标准品进行回收试验,其添加回收率为94.2%~102.2%。

参考文献

何照范,等.保健食品化学及其检测技术.北京:中国轻工业出版社.1998(黄宏南林升清傅武胜)

版权申明:转载请注明 植提网 » 芦丁的高效液相色谱测定法

免责声明:以上信息没有经过国家食品药品监督管理局评估和确认,来自公开发表的文献,由植提网整理发布,仅供参考。

如果您想对该产品信息进行补充请在文章后留言或者联系我们网站客服,将有机会获得免费企业或个人推广资格
植提网有您找的植物提取物信息

看过本文的还看过

我来说说

*

*

取消