芍药苷的高效液相色谱测定法

本方法适用于以毛茛科植物芍药(白芍)或白芍提取物为主要原料的保健食品中芍药苷的测定。

1．方法

提要样品直接用稀乙醇超声波提取后，在高效液相色谱仪中用反相柱分离，230nm紫外检测，以外标法定量。

2．仪器

(1) 高效液相色谱仪。

(2) 超声波提取器。

3．试剂

(1) 甲醇：色谱纯。

(2) 乙腈：色谱纯。

(3) 稀乙醇：52．9％(V／V)。

(4) 磷酸(AR)：0．1％(V／V)。

(5) 超纯水：双蒸水经Milli—Q型纯水器过滤。

(6) 芍药苷对照品：中国药品生物制品检定所。准确称取芍药苷对照品5mg，用甲醇溶解并定容至10ml，为芍药苷贮备液，临用前再用甲醇稀释成浓度为0．02～0．30mg／ml的标准使用液。

4．测定步骤

(1) 样品制备：准确称取样品适量，置于100ml容量瓶中(液体试样可减压浓缩至近干)，加稀乙醇约60ml，超声波提取30min后，冷却，加稀乙醇至刻度，混匀，静置，取上清液过0．45斗m微孔滤膜后，在高效液相色谱仪中进样测定。

(2) 标准曲线绘制：标准使用液各点分别在高效液相色谱仪中进样测定，并记录相应的峰面积值，绘制标准曲线。

(3) 色谱条件

色谱柱：Kromasil C18 250mm×4．6mm，5μm。

流动相：乙腈+0．1％磷酸(15+85)。

波长：230nm。

流速：1ml／min。

进样量：10μl。

5．结果计算

X=(c×V×100)/m

X——样品中芍药苷含量[mg／100g(mL)]；

c——从标准曲线查得样液中芍药苷的质量(mg)；

V——样液定容体积(ml)；

m——样品质量(g或ml)。

6．注释

(1)本方法线性范围0．02～0．30mg／ml，r=0．9998。

(2)平均回收率99．7％(n=3)，RSD=1．3％。

(3)精密度RSD=1．1％(n=5)。

(4)附：某样品芍药苷的标准及样品色谱图(图3—123、3—124)。

图3—123芍药苷标准色谱图

图3—124芍药苷样品色谱图

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