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芍药苷的高效液相色谱测定法

2013-10-26    分类:检测方法    0人评论

本方法适用于以毛茛科植物芍药(白芍)或白芍提取物为主要原料的保健食品中芍药苷的测定。

1.方法

提要样品直接用稀乙醇超声波提取后,在高效液相色谱仪中用反相柱分离,230nm紫外检测,以外标法定量。

2.仪器

(1) 高效液相色谱仪。

(2) 超声波提取器。

3.试剂

(1) 甲醇:色谱纯。

(2) 乙腈:色谱纯。

(3) 稀乙醇:52.9%(V/V)。

(4) 磷酸(AR):0.1%(V/V)。

(5) 超纯水:双蒸水经Milli—Q型纯水器过滤。

(6) 芍药苷对照品:中国药品生物制品检定所。准确称取芍药苷对照品5mg,用甲醇溶解并定容至10ml,为芍药苷贮备液,临用前再用甲醇稀释成浓度为0.02~0.30mg/ml的标准使用液。

4.测定步骤

(1) 样品制备:准确称取样品适量,置于100ml容量瓶中(液体试样可减压浓缩至近干),加稀乙醇约60ml,超声波提取30min后,冷却,加稀乙醇至刻度,混匀,静置,取上清液过0.45斗m微孔滤膜后,在高效液相色谱仪中进样测定。

(2) 标准曲线绘制:标准使用液各点分别在高效液相色谱仪中进样测定,并记录相应的峰面积值,绘制标准曲线。

(3) 色谱条件

色谱柱:Kromasil C18 250mm×4.6mm,5μm。

流动相:乙腈+0.1%磷酸(15+85)。

波长:230nm。

流速:1ml/min。

进样量:10μl。

5.结果计算

X=(c×V×100)/m

X——样品中芍药苷含量[mg/100g(mL)];

c——从标准曲线查得样液中芍药苷的质量(mg);

V——样液定容体积(ml);

m——样品质量(g或ml)。

6.注释

(1)本方法线性范围0.02~0.30mg/ml,r=0.9998。

(2)平均回收率99.7%(n=3),RSD=1.3%。

(3)精密度RSD=1.1%(n=5)。

(4)附:某样品芍药苷的标准及样品色谱图(图3—123、3—124)。

图3—123芍药苷标准色谱图

图3—123芍药苷标准色谱图

图3—124芍药苷样品色谱图

图3—124芍药苷样品色谱图

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