苦杏仁苷的高效液相色谱测定法

本方法适用于保健食品中苦杏仁苷的测定。

本方法苦杏仁苷的检出限为0．01μg。本方法线性范围为1．0～5．0μg／ml。

1．方法

提要试样中的苦杏仁苷经提取后在高效反相色谱C18柱上分离，用紫外检测器检测，以外标法定量苦杏仁苷的含量。

2．仪器

高效液相色谱仪，带紫外检测器。

3．试剂

除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB／T6682规定的一级水。

(1)甲醇：色谱纯。

(2)乙腈：色谱纯。

(3)0．05％(m／V)磷酸溶液：

0．59磷酸加水至1000ml，溶解混匀，过0．45μm微孔滤膜，待用。

(4)苦杏仁苷对照品：中国药品生物制品检定所。

(5)苦杏仁苷标准溶液：精密称取苦杏仁苷对照品约0．0100，移人100ml容量瓶中，加入甲醇，超声波振荡溶解，并用甲醇定容到100ml，成浓度为100μg／ml的标准储备液。取标准储备液5．0ml，用甲醇定容到50ml，成为浓度为10μg／ml的标准溶液。

4．测定步骤

(1) 样品处理：称取均匀样品0．59(精确到0．1mg)，置于50ml容量瓶中，加入40ml甲醇，超声振荡60min，取出，冷却后用甲醇定容至刻度，摇匀，经0．45μm微孑L滤膜过滤，清液待分析。

(2) 标准工作曲线绘制：精密吸取苦杏仁苷标准溶液(10μg／ml)1．0、2．0、5．0ml，分别置于10ml容量瓶中，用甲醇定容，摇匀。分别取10μl标准工作系列溶液进样分析，以测得的苦杏仁苷的峰面积分别对苦杏仁苷的浓度绘制标准曲线。

(3)色谱条件

色谱柱：ODS液相色谱柱，150mm×4．6mm，5μm。

流动相：乙腈+甲醇+0．05％(m／V)磷酸溶液(7+10+83，V／V／V)。

流速：1．0ml／min。

柱温：室温。

紫外检测波长：210nm。

(4) 样品测定：取样品滤液10μ1进液相色谱仪分离测定，根据色谱峰保留时间定性，以外标峰面积法进行定量。

(5)色谱图：苦杏仁苷标准色谱图见图3—120，样品色谱图见图3—121。

苦杏仁苷标准色谱图

苦杏仁苷样品色谱图

5．结果计算根据待测样品色谱峰面积，由标准回归方程式得样液中苦杏仁苷含量，计算出样品中的含量。样品中苦杏仁苷含量按下式进行计算：

X=(c×V×100)/(m×1000×1000)

式中X——样品中苦杏仁苷含量(g／100g)；

c——进样液中苦杏仁苷的浓度(μg／ml)；

V——样品的定容体积(ml)；

m——样品的取样量(g)。

6．注释

苦杏仁苷又称扁桃苷，化学名称为D(一)一扁桃腈一β—D一龙胆二配糖体，分子式为C20H27N11分子量为457。它的无水物熔点约有20℃，极溶于沸水，溶于水、乙醇，几乎不溶于乙醚。

版权申明：转载请注明 植提网 » 苦杏仁苷的高效液相色谱测定法

免责声明：以上信息没有经过国家食品药品监督管理局评估和确认，来自公开发表的文献，由植提网整理发布，仅供参考。

如果您想对该产品信息进行补充请在文章后留言或者联系我们网站客服，将有机会获得免费企业或个人推广资格